Monitorización ambiental en aisladores: partículas, viables y el problema del VHP

Qué hay que monitorizar

Dentro de un aislador de procesamiento aséptico, la zona donde están expuestos el producto, los envases y los cierres es de grado A. El Anexo 1 de las GMP de la UE (2022) fija las mismas expectativas que para cualquier zona de grado A, aplicadas a través de la barrera:

Tipo	Método	Cuándo
Partículas totales	Recuento continuo de partículas ≥ 0,5 µm y ≥ 5 µm con una sonda remota cerca de la zona crítica	Durante todo el procesamiento crítico, incluido el montaje de equipos
Viables en el aire	Placas de sedimentación (cada una expuesta no más de 4 horas) y muestreo activo de aire	Durante todo el procesamiento crítico
Superficies	Placas de contacto o hisopos en superficies críticas	Al final de la operación
Guantes	Impresiones de guantes (yemas de los dedos sobre agar)	Al final de la operación y tras intervenciones críticas

En grado A, el límite de viables es ausencia de crecimiento, y cualquier crecimiento se investiga. El Anexo 1 indica límites de partículas totales de grado A en operación de 3.520 por m³ ≥ 0,5 µm y 29 por m³ ≥ 5 µm. Los niveles de alerta por debajo de estos límites, fijados a partir de datos históricos, avisan pronto de una tendencia.

Dónde muestrear

Las ubicaciones de muestreo se eligen mediante una evaluación de riesgos documentada y deben ser representativas del aire y las superficies que llegan al producto expuesto, sin alterar el flujo de aire que lo protege. El estudio de humo es la mejor herramienta para ello: muestra de dónde viene el aire justo antes de llegar a los envases abiertos y dónde quedaría una sonda o una placa en su estela.

• Sondas de partículas cerca del punto de llenado y del recorrido de los tapones, orientadas hacia el flujo de aire. Mantenga corto y con pocas curvas el tubo de muestreo hasta el contador, porque las partículas, especialmente las ≥ 5 µm, se pierden en tubos largos.
• Placas de sedimentación tan cerca del producto abierto como permita el proceso, en posiciones que no generen remolinos.
• Muestreadores activos de aire con el cabezal dentro y la bomba fuera, para no alterar el equilibrio de presión del aislador durante el muestreo.
• Superficies que entran en contacto con elementos estériles o se tocan durante las intervenciones: piezas de formato, guías, el borde de la tolva de tapones.

El problema del VHP

El peróxido de hidrógeno y los medios de cultivo no se llevan bien. Hay tres situaciones que requieren atención.

1. Introducir los medios sin matarlos

Las placas y los cabezales de muestreo suelen introducirse tras el ciclo de descontaminación por una ruta de transferencia descontaminada: una caja de paso VHP, un puerto de transferencia o la propia esclusa del aislador. Su embalaje exterior debe descontaminarse, pero el vapor no debe llegar al agar. Las placas diseñadas para este uso vienen con varios envoltorios que se retiran uno a uno, y debe confirmarse la resistencia del embalaje al peróxido. Las placas que están dentro del aislador durante el ciclo no son válidas para la monitorización.

2. Peróxido residual en las placas expuestas

Tras la aireación queda un nivel bajo de peróxido de hidrógeno en el aire, que sigue desprendiéndose de los materiales. Las placas de sedimentación expuestas durante horas lo absorben. A niveles suficientemente altos puede inhibir el crecimiento de los microorganismos que caen en la placa y dar un falso «sin crecimiento». La defensa es un ensayo de promoción del crecimiento en condiciones reales: exponer placas en el aislador durante todo el tiempo de exposición al inicio de una tanda, inocularlas después con un número bajo de organismos de ensayo y confirmar la recuperación. Por esta razón, algunos medios se suplementan con catalasa u otros neutralizantes.

3. Compatibilidad del equipo de muestreo

Las sondas de contadores de partículas, los cabezales de muestreo y los tubos que permanecen dentro durante el VHP deben tolerar la exposición repetida y no deben retener peróxido que luego se desprenda. La electrónica debe estar fuera del aislador siempre que sea posible, con solo la sonda dentro.

Tendencias y desviaciones

Como los resultados de grado A son casi siempre cero, el valor de la monitorización del aislador está en la tendencia. Registre los resultados por ubicación, turno, intervención y día de campaña, y revíselos junto con los resultados de integridad de guantes y los datos de partículas. Cualquier recuperación de viables en grado A se investiga, identificando el organismo, y la investigación considera el ciclo de descontaminación, la ruta de transferencia, la integridad de los guantes y las intervenciones realizadas.

Lecturas relacionadas: absorción de peróxido de hidrógeno en el llenado en aislador y Aireación del VHP y H₂O₂ residual.